Κορωνοϊός επιχειρήσεις: Ο αντίκτυπος του SARS-CoV-2 στις επιχειρήσεις βιοκατασκευής

Κορωνοϊός επιχειρήσεις: Η εξάπλωση του COVID-19, που προκαλείται από το SARS-CoV-2, έναν τυλιγμένο, μονόκλωνο ιό RNA, χαρακτηρίστηκε παγκόσμια πανδημία στις 11 Μαρτίου 2020 και ο ιός έχει μολύνει εκατομμύρια άτομα και οδήγησε σε εκατοντάδες χιλιάδες θανάτους. Μία από τις κύριες προσεγγίσεις που χρησιμοποιήθηκαν για τον μετριασμό της εξάπλωσης του ιού ήταν η καθιέρωση παραγγελιών στο σπίτι και το κλείσιμο όλων των μη απαραίτητων επιχειρήσεων. Αυτά τα κλεισίματα δεν περιλαμβάνουν φαρμακευτικές και βιοφαρμακευτικές εταιρείες, οι οποίες διεξάγουν ουσιαστικό έργο για την ταχεία ανάπτυξη και κατασκευή νέων θεραπειών και εμβολίων για την καταπολέμηση της πανδημίας, καθώς και τη συνέχιση της παροχής σταθερής προσφοράς σωστικών φαρμάκων σε ασθενείς.

Ενώ η βιοφαρμακευτική βιομηχανία αντιμετωπίζει αναμφίβολα πίεση για την ταχεία ανάπτυξη νέων θεραπειών και εμβολίων για την καταπολέμηση του COVID-19, πρέπει επίσης να διασφαλίσει την ασφάλεια και τον εφοδιασμό όλων των σημερινών εμπορικών και κλινικών βιοθεραπευτικών και εμβολίων. Ως εκ τούτου, είναι σημαντικές οι στρατηγικές για την αποτροπή της μόλυνσης των διεργασιών και των προϊόντων από το SARS-CoV-2 και για τη διασφάλιση της συνέχειας της παραγωγής κατά τη διάρκεια της πανδημίας. Το Κέντρο Βιοϊατρικής Καινοτομίας (CBI) του Ινστιτούτου Τεχνολογίας της Μασαχουσέτης και οι δύο κοινοπραξίες βιοφαρμακευτικής βιομηχανίας, το Consortium on Adventitious Agent Contamination in Bioman Manufacturing (CAACB) και το Biomanufacturing Consortium (BioMAN), φιλοξένησαν διαδικτυακό σεμινάριο για τον αντίκτυπο του SARS -CoV-2 για τις Βιοκατασκευές στις 22 Απριλίου 2020. Το διαδικτυακό σεμινάριο παρουσίασε μια σειρά από προοπτικές εμπειρογνωμόνων,

Πριν από το διαδικτυακό σεμινάριο, εστάλη μια έρευνα 23 ερωτημάτων σε εταιρείες μέλη για να αποκτήσει ένα στιγμιότυπο σε ολόκληρη τη βιομηχανία του αντίκτυπου της πανδημίας COVID-19 στις επιχειρήσεις βιοκατασκευής. Τα αποτελέσματα αυτής της έρευνας πριν από το σεμινάριο, η οποία ολοκληρώθηκε από 15 εταιρείες μέλη, παρουσιάστηκαν επίσης και παρείχαν μια εικόνα υψηλού επιπέδου για το πώς οι βιοπαραγωγοί πλησίαζαν την παγκόσμια πανδημία. Αυτό το άρθρο παρουσιάζει τα βασικά σημεία που συζητήθηκαν στο διαδικτυακό σεμινάριο, καθώς και τυχόν βασικά συμπεράσματα που βασίζονται στις περιορισμένες πληροφορίες που ήταν διαθέσιμες εκείνη τη στιγμή, για να παράσχουν στις ανασυνδυασμένες κοινότητες πρωτεΐνης, εμβολίου και κυτταρικής και γονιδιακής θεραπείας κοινότητες.

Πρόληψη της διαδικασίας και της μόλυνσης προϊόντων από το SARS-CoV-2

Η πρόληψη της βιοφαρμακευτικής διαδικασίας ή της μόλυνσης του προϊόντος με έναν αναδυόμενο ιό, στην περίπτωση αυτή SARS-CoV-2, εξαρτάται πρώτα από την εκτίμηση του κινδύνου που ενέχει ο ιός σε μια διαδικασία παραγωγής. Και οι 15 εταιρείες που απάντησαν στην έρευνα πριν από το σεμινάριο έδειξαν ότι είχαν πραγματοποιήσει αυτήν την αξιολόγηση κινδύνου. Τα βασικά ερωτήματα που πρέπει να αντιμετωπιστούν σε μια αξιολόγηση κινδύνου είναι τα εξής:

• Ποιες είναι οι πιθανές πηγές του SARS-CoV-2 και είναι αυτές οι πιθανές πηγές εισόδου στη διαδικασία παραγωγής;
• Μπορεί το SARS-CoV-2 να αναπαραχθεί στη γραμμή παραγωγής παραγωγής;
• Είναι δυνατόν να εντοπιστεί η παρουσία του SARS-CoV-2 με υπάρχουσες ανιχνεύσεις ανίχνευσης ιών;
• Μπορεί η διαδικασία καθαρισμού να αφαιρέσει ή να απενεργοποιήσει το SARS-CoV-2;

Πιθανές άμεσες πηγές SARS-CoV-2 αναγνωρίστηκαν ως χειριστές, τράπεζες κυψελών και πρώτες ύλες. Ως πρόχειρο μέτρο της αντιληπτής σημασίας αυτών των τριών πιθανών πηγών για το SARS-CoV-2, το 100% των εταιρειών που απάντησαν στην έρευνα πριν από το σεμινάριο είχαν αξιολογήσει τον κίνδυνο εμφάνισης του ιού από τους μολυσμένους υπαλλήλους στις διαδικασίες παραγωγής τους και το 60% είχε αξιολόγησε τον κίνδυνο μολυσμένων πρώτων υλών ως πηγή. Το προσωπικό είναι μια πιθανή πηγή του ιού, καθώς έχει τεκμηριωθεί στη βιβλιογραφία ιογενής απόρριψη από ασυμπτωματικά άτομα (1). Υφιστάμενοι έλεγχοι παραγωγής και, στην περίπτωση παραγωγής ανασυνδυασμένης πρωτεΐνης, ο ελάχιστος αριθμός ανοιχτών χειρισμών θεωρήθηκε ότι καθιστά απίθανη την πιθανότητα άμεσης μετάδοσης από το προσωπικό. Ομοίως,

Συγκριτικά, όπως αναφέρεται στην έρευνα πριν από το σεμινάριο, καμία εταιρεία δεν είχε δοκιμάσει τράπεζες κυττάρων για την παρουσία του SARS-CoV-2 συγκεκριμένα. Η εισαγωγή του SARS-CoV-2 από τράπεζες κυττάρων είναι πολύ απίθανη, διότι οι έντονες διαδικασίες διαλογής μπορούν να καθορίσουν γενικούς ρύπους σε υψηλό βαθμό ευαισθησίας, καθώς και το γεγονός ότι το SARS-CoV-2 είναι ένας πρόσφατα αναδυόμενος ιός, και οι περισσότερες τράπεζες κυττάρων σε χρήση είχε καθιερωθεί πριν από την πρώτη εμφάνισή του. Ωστόσο, οι τράπεζες κυττάρων που δημιουργήθηκαν κατά τη διάρκεια της τρέχουσας πανδημίας ενδέχεται να έχουν αυξημένο κίνδυνο.

Μια πιθανή έμμεση οδός εισόδου είναι από το περιβάλλον παραγωγής μέσω προσωπικού και το 60% των ερωτηθέντων δήλωσαν ότι είχαν αξιολογήσει το περιβάλλον ως πιθανή οδό εισόδου ιού. Μέχρι σήμερα, δύο δημοσιεύσεις έχουν διερευνήσει την επιμονή του ιού στις επιφάνειες. Και οι δύο μελέτες έδειξαν ότι ο ιός θα μπορούσε να παραμείνει στο περιβάλλον για παρατεταμένες χρονικές περιόδους, με εκτιμήσεις της επιβίωσης SARS-CoV-2 που κυμαίνονται μεταξύ τριών και επτά ημερών σε ανοξείδωτο χάλυβα και πλαστικό (2,3). Είναι σημαντικό να σημειωθεί ότι μια έκθεση αξιολόγησε την επιφανειακή σταθερότητα τόσο του SARS-CoV-1 όσο και του SARS-CoV-2. Παρά την υποτιθέμενη ομοιότητά τους, και οι δύο ιοί παρουσίασαν διαφορετική σταθερότητα σε ορισμένες από τις εξεταζόμενες επιφάνειες (3). Δεδομένης της δυνατότητας επιβίωσης του ιού στο περιβάλλον, Μία δημοσίευση ανέφερε την ικανότητα μιας ποικιλίας κοινών απολυμαντικών να απενεργοποιήσουν το SARS-CoV-2. Η έκθεση διαπίστωσε ότι, μετά από επώαση πέντε λεπτών με όλα τα απολυμαντικά που ελέγχθηκαν σε διάλυμα, εκτός από το σαπούνι χειρός, δεν ανιχνεύτηκε ιός.

Το δεύτερο ερώτημα είναι εάν το SARS-CoV-2 μπορεί να πολλαπλασιαστεί σε κυτταρικές γραμμές παραγωγής. Το σαράντα τοις εκατό των εταιρειών που απάντησαν στην έρευνα πριν από το σεμινάριο είχαν αξιολογήσει, σε μεγάλο βαθμό με βάση τη βιβλιογραφία, την ικανότητα των κυτταρικών σειρών παραγωγής τους να υποστηρίξουν την αναπαραγωγή του SARS-CoV-2. Τα στοιχεία που παρουσιάστηκαν κατά τη διάρκεια του διαδικτυακού σεμιναρίου και αναφέρθηκαν στη βιβλιογραφία δείχνουν ότι τα κύτταρα Vero μπορούν να υποστηρίξουν την αντιγραφή του SARS-CoV-2, με παρατηρήσιμο κυτταροπαθητικό αποτέλεσμα σε μια δοκιμασία TCID50 (3). Αντίθετα, τα στοιχεία που παρουσιάστηκαν κατά τη διάρκεια της συνάντησης και αναφέρθηκαν στη βιβλιογραφία δείχνουν ότι τα κύτταρα ωοθήκης Κινέζικου χάμστερ (CHO) δεν μπορούν να υποστηρίξουν την αντιγραφή των κοροναϊών, εκτός από τον βοοειδή κοροναϊού που καλλιεργήθηκε παρουσία ορού (4). Επιπλέον, μια πρόσφατη εκτύπωση εκτύπωσης παρουσίασε δεδομένα που αποδεικνύουν ότι CHO, HEK293,

Στη συνέχεια, είναι δυνατόν να ανιχνευθεί η παρουσία του SARS-CoV-2 εάν εισέλθει στη διαδικασία βιοπαραγωγής; 

Η δοκιμασία ιού in-vitro θεωρείται ως η δοκιμασία ανίχνευσης ευρέος φάσματος χρυσού και τα κύτταρα Vero είναι μία από τις κυτταρικές σειρές δείκτες που χρησιμοποιούνται συνήθως σε αυτήν την ανάλυση. Όπως σημειώθηκε νωρίτερα, τα κύτταρα Vero έχουν αναφερθεί στη βιβλιογραφία για τη μέτρηση του TCID50 του SARS-CoV-2 (3). Μερικές εταιρείες είχαν αξιολογήσει άμεσα την ικανότητα του in-vitroανάλυση ιών για την ανίχνευση SARS-CoV-2. Μια εταιρεία σημείωσε στην έρευνα πριν από το σεμινάριο ότι είχαν επιβεβαιώσει την ικανότητα της Vero να ανιχνεύσει το SARS-CoV-2 σε εργαστήριο δοκιμών συμβάσεων και, κατά τη διάρκεια του διαδικτυακού σεμιναρίου, μια εταιρεία σημείωσε ότι το τυπικό πάνελ κυτταρικών γραμμών ήταν ικανό να ανιχνεύσει SARS- CoV-2. Από το διαδικτυακό σεμινάριο, τουλάχιστον μία προ-εκτύπωση δημοσίευσης ανέφερε την ικανότητα δοκιμών ιού in-vitro με κύτταρα Vero ως μία από τις κυτταρικές σειρές δείκτη για την ανίχνευση SARS-CoV-2 (5). Μερικές εταιρείες ανέπτυξαν επίσης μοριακούς προσδιορισμούς για την ανίχνευση του SARS-CoV-2, αλλά από τον Απρίλιο του 2020, καμία εταιρεία δεν πραγματοποίησε ρουτίνα πολλών δοκιμών ειδικά για αυτόν τον ιό.

Τέλος, εάν ο ιός εισέλθει στη διαδικασία παραγωγής χωρίς ανίχνευση, μπορεί η διαδικασία καθαρισμού να αφαιρέσει ή να απενεργοποιήσει το SARS-CoV-2; Από τις 15 εταιρείες που απάντησαν στην έρευνα πριν από το διαδικτυακό σεμινάριο, το 60% δήλωσε ότι είχε πραγματοποιήσει αξιολόγηση κινδύνου των λειτουργιών της μονάδας καθαρισμού κατάντη για να απενεργοποιήσει ή να αφαιρέσει κοροναϊούς. Αυτή η αξιολόγηση της κατάντη κάθαρσης για την αφαίρεση ή την απενεργοποίηση του SARS-CoV-2 βασίστηκε σε δεδομένα από άλλους ιούς με περίβλημα μοντέλου, με παρόμοια βιοφυσικά χαρακτηριστικά με το SARS-CoV-2, που χρησιμοποιήθηκε για μελέτες εκκαθάρισης ιών σύμφωνα με το Διεθνές Συμβούλιο Εναρμόνισης (ICH) Q5A (όχι μοντέλο coronavirus) (6). Αν και δεν παρουσιάστηκαν δεδομένα για το SARS-CoV-2, οι επικυρωμένες και ορθογωνικές λειτουργίες μονάδας εκκαθάρισης ιών για άλλους περιβλημένους ιούς αναμένεται επίσης να είναι αποτελεσματικές για το SARS-CoV-2, όπως φαίνεται σε μελέτες με προηγούμενα στελέχη κορανοϊού. Επισημάνθηκε επίσης ότι η ιική διήθηση επικυρώνεται για την ικανότητά της να καθαρίζει τον λεπτό ιό των ποντικών (MVM), έναν 20-nm παρβοϊό, και ως εκ τούτου αναμένεται να παρέχει ισχυρή κάθαρση μεγαλύτερων περιβλημάτων ιών όπως το SARS-CoV-2, το οποίο έχει αναφερθεί σε μέγεθος 60 έως 140 nm (7).